如何正確把控發酵罐的接種量?
時間:2023.02.17

在微生物發酵中,因其分布廣和體積小等特性,導致染菌的因素也多樣。所以我們無法在實驗中及時判斷是否染菌,只有培養一段時間才能發現,最后也只能作廢,十分影響實驗進度及成本。因此,為了確保不會染菌和實驗的順利,在操作前也要按照規范進行無菌操作。除了之前對于發酵罐體的滅菌操作,在接種時更是要注意。
1. 發酵罐的接種量
首先需要注意把控接種量,適宜的接種量可幫助罐內的菌種繁殖,發酵產物快速生成,同時也可減少雜菌生長。但過大過小都會影響產物繁殖。
l 接種量過大時,由于發酵罐內的營養和氧氣量是一定,而菌種過量,會很容易導致發酵罐內溶氧不足,還會有大量的代謝物,產物合成受到阻礙;
l 接種量過小時,發酵液中培養物不足,發酵時間推遲,發酵罐的生產效率大大降低
那么,究竟如何確定接種量呢?其實也就是將接種液體體積和之后的培養液體積。按照規定百分比確定即可。
首先需要注意把控接種量,適宜的接種量可幫助罐內的菌種繁殖,發酵產物快速生成,同時也可減少雜菌生長。但過大過小都會影響產物繁殖。
l 接種量過大時,由于發酵罐內的營養和氧氣量是一定,而菌種過量,會很容易導致發酵罐內溶氧不足,還會有大量的代謝物,產物合成受到阻礙;
l 接種量過小時,發酵液中培養物不足,發酵時間推遲,發酵罐的生產效率大大降低
那么,究竟如何確定接種量呢?其實也就是將接種液體體積和之后的培養液體積。按照規定百分比確定即可。
2.發酵罐的接種方式
其次就是接種的方法。對于大型的工業化生產通常是采用發酵罐的壓力差來進行接種。而對于小型發酵罐則是采用另外兩種方式進行接種:火焰接種和注射器接種。

注射器接種
步驟1 將接種口和周圍用酒精棉進行消毒,操作者雙手也要消毒
步驟2 調節發酵罐罐壓(具體操作見下篇)
步驟3 準備好無菌的注射器(提前在超凈臺吸入菌種液體),無菌操作將種子液安全注入發酵罐內。
此種接種方式可以避免菌種與外界空氣接觸,避免了明火使用,適用于5L以下的小型發酵罐。
今天先帶大家了解其中一種接種方式,繼續關注霍爾斯(HOLVES),下篇接著講述。